【理化】理化分析实验日常检测经典问答汇总！ 添加时间：2019-01-24 1. E-201PH计复合电极的温度范围是多少？ 答：5–60℃，但高于室温或低于室温测量时，必须进行温度校正，否则将试样冷却(加热)到室温再测。 2.PH计什么情况下需事先标定？ 答：溶液温度与标定时温度有较大变化，干燥过久的电极，换过了的新电极，测量过浓的酸和碱，测量过较浓的有机溶剂。 3.PH计电极引入导线很脏，结果会怎样？ 答：电极引入导线不清洁，使测量不稳定。 4.使用微量水测定仪测样时，应注意什么？ 答：（1)看仪器是否稳定，是否出现:stable”；(2)看瓶残液是否超过刻线；(3)干燥剂是否过期；(4)称样过程中应将针孔用胶垫堵住，以防样品挥发。 5.电导率检测时不知道所测溶液的电导率多大范围，如何处理？ 答：应先把量程选择开关，扳到******位置测，然后逐渐降档，以防止表针打弯。 6.铂黑电极和铂亮电极使用有什么区别？ 答：如果被测溶液的电导率低于10us/cm，使用铂亮电极DJS-1；在10us/cm以上则使用铂黑电极DJS-10。 7.当被测溶液电导率大于10us/cm，DJS-1型铂亮电极测不出来怎么办？ 答：应选用DJS-10型的铂黑电极，将电极常数补偿器调节到所配套的电极常数的1/10的位置上，然后将所测的电导率再乘以10，即为测的值。 8.如果粘度管的毛细部分在测试时有断流现象如何处理？ 答：用浓硫酸处理粘度管内部，再用甲醇冲洗。 10.分光光度计校正零点所用试剂的根据是什么？ 答:依据所溶解或稀释试样的溶剂是什么而选择的，******试剂的吸光值。 11.影响溶液的吸光值有哪些因素？ 答：1)样品是否过滤；(2)仪器零点有没有校正；(3)比色皿脏；(4)所选用波长不对。 12.分析胶乳的浊度值所用仪器是什么名称?波长多大？比色皿多大？ 答：用分光光度计，波长700nm，比色皿1cm。 13.苯乙烯中聚合测定的原理是什么？ 答：苯乙烯单体中存在的苯乙烯聚合物不溶于甲醇，所以在苯乙烯试样中加入干燥的甲醇，通过测定其浊度即可确定聚合物的含量。 14.苯乙烯产品中加阻聚剂的目的是什么？ 答：减少苯乙烯单体的聚合损失，防止设备堵塞和运输途中产品聚合。 15.当测定苯乙烯产品中聚合物含量超过15mg/kg(ppm)时，应怎样进行稀释？ 答：从已配制好的样品中用移液管吸取20mL的样品，放入50mL容量瓶中，用正已烷稀释至刻度，进行测定，如聚合物含量还高再继续烯释。 16.叙述苯乙烯中阻聚剂(对-特丁基邻苯二酚)含量的测定原理？ 答：用氢氧化钠水溶液萃取苯乙烯，分离出含有TBC(已转化为有色醌式结构)的水层，然后进行比色测定。 17.灰分检测值偏高的原因有哪些?处理措施是什么？ 答：(1)马福炉温度没有达到设定值，放入样品前温度没有达到设定值就将样品放入马福炉。 (2)灼烧时间不够（应按规定时间）。 (3)所采试样不均(置换几次后再采) 。 (4)取出试样的放置时间过长(冷却室温马上就称)。 上一篇：分享丨几种菌种的保存及复苏方法！ 下一篇：中试放大中的注意事项

中试放大中的注意事项 添加时间：2019-01-15 1.1简介 在工艺放大过程中遇到的很多“意外”，都是可以预测的，如果小试时能多注意一些细节，做一些简单的实验，收集一些数据，对以后的工艺放大会有很大帮助。 试验采用的玻璃烧瓶，一般不会有腐蚀问题（玻璃不耐氢氟酸和可能分解产生氟的化合物、热的浓碱）。但生产中物料和材质的相容性是必须考虑的，这也是GMP对设备选型的要求。如果小试时能考虑做一下材质的腐蚀试验（在反应体系中加入不锈钢或其它材质试片）就会节省以后设备选型时的时间。 简单测量一下滤饼的堆密度，有利于今后生产中对于产品滤饼体积的估算和设备选型，过滤的速度和过滤面积、滤饼的厚度都有一定关系。 1.2 典型的放大问题 工艺放大中***常见的问题是反应选择性改变，这会影响到产品的产率和纯度，这主要是小试的混合效果和生产不一致。如果在小试已经评估过转速的影响，在出现问题时，就会快速找到原因，中试车间的反应釜都配有变频调速，可以进行适当的调整以确定合适的转速。 在放大中出现新的晶型也是常见的。 放大中，产品的分离也会出现问题，生产中对于滤饼的洗涤效果达不到小试的水平，杂质不能完全洗去。带搅拌的过滤洗涤干燥三合一设备，在某些工艺条件下可以代替离心机，使用三合一设备可以过滤后直接加入溶剂洗涤和打浆，洗涤效果要比离心机好。 产生放大问题的另一原因是生产操作时间的影响，小试有必要进行时间延长对产品影响的实验。在实际生产中，由于蒸馏时间的延长，导致产物分解，发生副反应的情况出现多次。 放大问题产生的原因，对于反应机理不理解，结晶和混合是***常见的三种原因。在下文中我们可以看到虽然有很多问题是和混合和传热有关，但根本在于对于化学的理解，除了主反应，还会有什么副反应发生？什么条件下会促进副反应的发生？放大中什么会改变？这些改变对反应选择性会有什么影响？在生产实际中，目前反应釜的传热条件基本无法改变（可以通过控制加热、冷却介质和釜内体系的温差，加热/冷却的速度来减少局部过冷/热），混合可以通过转速和桨型的选择加以改善。 2.1 放大中需要做的 1 团队的合作 只有不同专业人员的紧密合作，才能得到稳定、可放大的工艺。化学家对于各种变量对于产品质量的影响有着深刻的理解。工艺工程师对于什么样的操作在生产中是不可行的或不安全的有更好的认识。 同时、如前文所述，有很多测试是化学家在工艺发展的早期就可以完成的。比如干燥、蒸馏的实验，记录一下物系的压力、密度等物理参数。 2 工艺发展和操作的原则 无论公司的大小，都需要制定一些基本的规则保证小试工艺安全的转移至公斤实验室和中试车间。 建立清晰、严格的规程和需要小试提供的文件资料，顶住压力，即使在有时限要求的情况下，依然严格执行。这些资料包括生产操作规程，并且有按此操作规程进行的三批小试试验，至少一批采用和生产相同规格的原料。清洗验证方案，避免交叉污染的可能。工艺安全分析资料。 虽然上述要求会影响“效率”，但在严格执行下，多年来没有出现过严重的事故和放大失败的批次。 3设备台帐 建立公斤实验室和中试车间主要设备（反应釜、过滤器、干燥器、泵等）的操作和维护日志。包括批记录、清洗记录、验证记录和其它维护记录。 4 样品数据库 建立样品数据库，收集整理每一个样品（产品、湿滤饼，蒸馏液，工艺副产物）数据。包括生产批号、采集时间、分析结果等。这些数据具有重要参考价值，收集整理可以保证数据不遗失。为了研究和法规的原因，常需要对这些样品再次分析确定，同时可以进行质量恒算。 5样品保存 随着样品数据库建立，需要设立专门的样品室保存样品，注意干燥、避光、低温。重要的是建立一个体系，便于需要时可以快速找到需要的样品。 6固定工艺 在试产前确定和解决相关问题。在放大前的***后时刻变更工艺是危险的。可能导致意外和安全问题。 7工艺风险评估（hazop分析） 在新工艺试产前要进行风险评估。应有不同部门人员组成评估组，对于整个工艺安全和预防措施进行详细审核。 没有100%安全的工艺，但根据评估结果就可以采用相应的措施，避免或者减少安全事故。 8确定反应能量 对于放热反应的危害认识不足或没有辨识，这可能是造成重大伤害和事故的主要原因。生产中反应釜单位体积的传热面积远小于小试烧瓶。500ml烧瓶的传热面积大约为0.02㎡，而4000L的反应釜只有10.7㎡传热面积。 因此安全的放大反应需要进行量热或类似的实验。对于这方面的工作，正逐渐引起我们的重视。虽然没有发生过严重的事故，但生产中的冲料时有发生。在小试阶段要避免采用含有高能官能团的化合物（如含有多个胺基的化合物，四氮唑、水合肼），可能产生自由基的反应和产生气体的反应要有足够的重视，并在工艺转移时描述清楚。 9建立生产操作规程 生产操作规程的重要性无需多说，重要的是保证规程的时效，尽量减少文字错误。利用文档编辑时使用“复制—粘贴”在带来便利的同时，也会导致无意间的错误。这也是小试按照工艺规程重复实验的重要性。 10原材料 实验采用工业级原料，在扩产前对所有原料进行小试实验。这样如果放大不成功，可以直接******原材料的原因。除了原料的化学纯度，物性对于反应也会有影响，比如固体物料的颗粒度。 11把握机会 为了准备中试生产需要大量的劳动、时间和金钱。然而很多时候，仅有有限的数据被收集。这就是为什么要尽可能利用每批生产机会去学习的重要性。一个详细的取样和分析计划可以帮助完成质量平衡计算，辨识没有预期的副产物和解决其它可能产生的放大问题。每一股工艺物流（包括废弃物）都要称量、取样。没有其它机会能象中试这样收集这么多的数据！ 所有的观察现象都应记录，分离的中间体和样品应该留样备用。要利用机会收集尽可能多的放大数据并对生产进行详细的总结分析形成报告以备将来参考。 在生产转移时需要进行验证，在此之前需要进行试产熟悉工艺，确定工艺规程和操作规程，如果试产顺利，验证的时间也会缩短。而试产的顺利取决于前期的小试研发、中试阶段对于工艺问题研究的深入程度。 2.2 放大中需要避免的 1避免复杂 在工艺发展和放大中要尽可能简单，越简单，产生工艺错误的机会越少。在实际操作中，越复杂的工艺越不易为操作人员掌握，也很难通过操作规程详细的描述。 简化不仅是从安全考虑，同时可以减少生产周期，减少废物等。避免使用非常特殊的设备的反应。或者非常危险需要安全设施的反应，如硝化、氢化等。 工艺的简化来源于反应路线的简化，往往反应步数***少的路线就是******的路线。在工艺研发阶段需要考虑是否可以避免中间体的分离，合并反应，减少溶剂使用的种类和数量。 2 避免投入所有原料再加热 工艺中***危险的操作之一是将所有反应物一起加入再升温反应。同样不要***后投料后再加入催化剂。危险在于一旦反应混合物达到反应温度开始反应，就没有办法停止。有些反应是高度放热的，并且会自行升温至越来越高的温度。如果达到混合物的沸点就会沸腾甚至冲料。有些原料会在更高温度发生降解，并且降解会自加速，放热会比反应本身更剧烈。当反应需要紧急冷却时，切换和降温也没有小试方便迅速。 当然对于已经理解并确定是安全的反应，一次投入原料是可以接受的。但对于首次放大的工艺应是禁止的。 放热反应***常用的控制是采用一种试剂滴加，滴加的时间取决于反应的热量和反应釜的移热能力。在滴加时，要避免原料的累积，造成突然反应，需要在适合的温度滴加，保证滴加的原料能立即反应，比如格式反应。 3避免在没有搅拌的情况下加热 生产中反应釜内的传热主要依靠搅拌。除了保证安全，良好的搅拌能减少釜内的温度差，使温度读数更准确。一般釜壁的温度会比体系中心温度更高些，会造成局部过热，是产品分解或结焦，***终影响产量和质量。也不能停搅拌，直到反应结束并冷却到安全温度。 比如一次事故的发生是由于有机胺和硫酸的强放热反应。按照工艺，需要在剧烈搅拌下将胺缓慢加入热硫酸中，反应是双相体系。一天操作员工更换，在没有开搅拌的情况下，开始加入胺，胺沉淀在反应釜底部没有反应。稍后另一个员工发现搅拌没有开，就启动了搅拌，在这一刻所有物料瞬间反应导致了爆炸。 4不要忽视潜在的降解反应 不要在已知反应物降解温度50℃内进行反应，以免反应失控。除了对放热反应的量热评估，可以自加速的降解反应也需要考察。这需要附加的实验，比如绝热反应量热（ARC）, 如果分析认为反应可能产生潜在的不稳定易降解产物，应进行相应的量热实验。 有些降解反应可能进行的很慢，通过常规的测试无法辨识。即使低于引发温度，反应放热依然会以很小的速度增加，等到发现温度明显上升时，分解反应已经发生。 国内一家原料药厂在进行重氮化反应时，在保温阶段，操作人员关闭蒸汽阀门，离岗吃饭，由于蒸汽阀门内漏，导致反应温度上升，重氮盐分解。由于无人值守，没有及时发现温度上升，等当班工人回岗发现温度异常上升时，反应已无法控制，***终发生爆炸，整个车间被毁。 5避免向反应混合物中投加固体 不要将固体投入正在回流或热的反应混合物。这是在小试常见的操作，但在生产中难于实现。分次投加是为了控制反应，在小试中很容易实现。但在生产中投加固体物料必然要打开人孔，釜内已有的溶剂蒸汽会和空气形成爆炸性混合气体。如果物料反应很快，会导致料液喷出人孔（投钠氢时出现过类似事故）。 一种改进是考虑先加固体，再加溶剂。但改变投料顺序可能会影响反应的选择性。另外可以将固体溶解投加，甚至形成料浆再压入反应釜。 如果无法改变工艺，需要从工程方面考虑怎样进行密闭条件下的投加。这方面一直在进行尝试，进行改进，比如使用真空上料等，但目前还没有一个经济、良好的和普遍适用的解决方法，尤其对于一些具有腐蚀、剧毒品和流动性差的固体原料和中间体。 6避免蒸发至干 使用旋转蒸发将料液浓缩至干的操作是小试很常用的。但在车间大多数反应釜有大约10–20%***小搅拌体积。当料液浓缩到***后，不可避免会在没有良好搅拌的情况下对物料进行加热。没有搅拌情况下进行加热的危害前已述及。这会引起安全和质量问题。当蒸干是为了更换溶剂时，采用蒸至一定体积时，加入后一种溶剂反复拖带，可以避免浓缩至干的操作，但这需要看两种溶剂的相对挥发度和是否共沸。更有效率的方式是采用“恒体积蒸馏”。 浓缩至干的工艺在我们的生产中很常见，如果小试工艺提供的工艺浓缩至干，生产也会按照实行。浓缩至干的操作可能比较简便，但是不可控的，没有衡量标准，也只有在后续产量和质量出现问题才会发现可能是前步蒸的不够干。出现过搅拌轴断裂，溶剂替换不彻底导致产率下降，浓缩后搅拌不好淬灭冲料。因此在研发时需要考虑是否有更好工艺实现。 7避免对工艺时间估计不足 对于初次接触工艺放大的人，可能******的意外就是所有的操作都要这么长时间。重要的是在放大前进行所有涉及原料、中间体和产品的稳定性评估。避免反应后必须马上淬灭和分离的反应。 8避免忽视溶剂使用问题  小试中可能会用到具有良好溶解性、易于蒸馏回收的溶剂。但其中一些是在生产中需要避免的。这包括所有的一类溶剂，闪点低于-18℃的溶剂。正己烷的闪点-23℃，并且导电性差，一般国外企业在生产中禁止使用，采用庚烷代替。但由于成本的问题，在一些工艺中还有使用。二氯甲烷的毒性低于其它氯代烷烃溶剂（氯仿，二氯乙烷等），但还是要尽量避免使用，在有些工艺中可以用甲基叔丁基醚、甲苯代替。 9避免对于淬灭和提取的忽视 很多放大的问题来源于后处理过程。因此应该得到和反应一样的重视。避免分层的上层是废液。提取往往是溶剂体积******的步骤，为了提高单位体积的产能，应该尽量减少提取用的溶剂。随着溶剂数量的增加，分层和放料的时间也随之延长，乳化的现象可能加剧。在弱酸/碱环境下，萃取和分离时间的延长可能导致含易水解官能团的化合物水解。 在一个API中间体放大到80吨/年的规模时，其中一步提取需要2000L溶剂提取两次，共4000L溶剂，溶剂的转移就需要三四个小时。 乙酸乙酯作为一种常见的萃取溶剂，在酸/碱性环境下易水解产生乙酸，从而使体系酸性增强。可以采用更稳定的乙酸异丙酯或丁酯代替，溶剂饱和含水量较低更易回收。 10 安全 安全是***重要的。这里强调的是不要冒险把有限的原料一次性反应完。要预备可能的失败，尤其是对于新工艺。可以分成两批或更小的批次进行，避免由于所有的原料都用光而导致项目的暂停。同时小的批次单位传热面积更高，混合问题会减少，放大因数也相应减少。 3 总结 在及时、成功的放大过程中，经验是很重要的。同时也有很多******的参考文献值得学习和采用。尽管在首次放大时不可能预测所有的意外，但上述罗列的注意事项会引导对于工艺发展和放大的进一步考虑，同时意识到合作的重要性会使成功的机会更大。 上一篇：【理化】理化分析实验日常检测经典问答汇总！ 下一篇：常用化学试剂英文缩写一览表，有多少你还不会？

残留溶剂方法建立及方法学的验证 添加时间：2019-04-23 一、概述 药物中的残留溶剂系指在原料药或辅料的生产中、以及在制剂制备过程中使用或产生而又未能完全去除的有机溶剂。根据有机溶剂对人体及环境可能造成的危害的程度， ICH将有机溶剂分为避免使用、限制使用、低毒和毒性依据尚不足四种情况。因残留溶剂会影响产品的安全性，故需对其进行研究。 二、研究方法的建立及方法学验证 在确定了需要进行残留量研究的溶剂后，需要通过方法学研究建立合理可行的检测方法。目前，残留溶剂的测定一般采用气相色谱法，推荐使用毛细管色谱柱- 顶空进样系统，当然也可以使用普通填充柱，溶液直接进样方法。对不宜采用气相色谱法测定的含氮碱性化合物，如N- 甲基吡咯烷酮等可采用其它方法，如离子色谱法等。 GC法具有检测灵敏度较高，选择性较好的特点，采用此法所需的样品用量较少，基本可以满足所有残留溶剂测定的要求。采用GC法时，需要结合药物和所要检测的溶剂的性质，通过方法学研究确定合适的检测条件。 1 研究方法的建立 1.1 确定被测的有机溶剂 根据制备工艺确定被测有机溶剂的范围。通常应对制备工艺过程中使用的二类以上溶剂和重结晶用溶剂，以及根据工艺特点要求的其它溶剂进行残留量的研究。建议对合成***后三步使用的三类溶剂也进行研究，这样能更好地对未知峰进行归属；对制剂过程中使用的有机溶剂也建议考察其残留情况，特别是缓、控释微丸包衣过程使用的有机溶剂更应引起注意。 1.2 色谱柱选择 按照相似相溶的原理选择色谱柱。毛细管柱有极性柱、非极性柱、弱极性柱和中等极性柱。填充柱有高分子多孔小球或涂渍适宜固定液的填充柱。测定含氮的碱性有机溶剂时，由于普通气相色谱仪的不锈钢管路、进样器衬管等对有机胺等含氮的碱性化合物具有较强的吸附作用，致使其检出的灵敏度降低。通常采用弱极性色谱柱或经碱处理过的色谱柱分析含氮的碱性有机溶剂，如果采用胺分析专用柱进行分析，则效果更好。 1.3 进样方法 GC 法包括溶液直接进样和顶空进样两种进样方法。通常情况下，沸点低的溶剂建议采用顶空进样法，沸点高的溶剂可以采用溶液直接进样法，当样品本身对测定有影响时，也建议采用顶空进样法。 1.4 供试品溶液和对照品溶液的配制 对于固体原料药，如采用溶液直接进样法，需先用水或合适的溶剂使原料药溶解，以使其中的有机溶剂释放于溶液中，才能被准确测定。如采用顶空进样法，通常以水作溶剂；当药物不溶于水，但可溶于一定浓度的酸或碱液中时，可采用不挥发的酸或碱液为溶剂，但不能使用盐酸溶液或氨水；对于非水溶性药物，可采用合适的溶剂,如N,N—二甲基甲酰胺、二甲基亚砜等为溶剂。以DMSO 等为溶剂时，可加入一定量的水以增加检测的灵敏度，或用盐析的方法增加灵敏度。 1.5 供试品溶液和对照品溶液浓度的确定 配制供试品溶液的浓度应满足定量测定的需要，一般供试品取样量在0.1 ~1g之间。限度检查时对照品溶液的浓度可按规定的限度配制，定量测定时按实际残留量配制，浓度相差******以不超过 2 倍为宜。 1.6 检测器的选择 一般选用FID检测器，对含卤素的有机溶剂如氯仿等，采用 ECD检测器可得到更高的灵敏度。通常可根据药物溶剂的残留情况选择合适的检查方法。当需要检查的有机溶剂数量不多，且极性差异较小时，可选择毛细管色谱柱 – 顶空进样-等温法。当需要检查的有机溶剂数量较多，且极性、沸点差异较大时，可选择毛细管色谱柱 -顶空进样- 程序升温法；也可选择填充柱或适宜极性的毛细管柱直接进样法。 1.7 顶空进样法还要对顶空温度和顶空时间进行选择 顶空温度应根据溶解供试品溶剂的特性及供试品中残留溶剂的沸点选择。以水为溶剂及测定低沸点残留溶剂时，顶空温度不宜超过85 ℃；测定沸点较高的残留溶剂时，通常选择较高的顶空温度；但此时应兼顾供试品的热分解特性，尽量避免供试品产生的挥发性热分解产物干扰测定结果。以 DMSO为溶剂时，顶空温度不宜超过115 ℃。例如，在申报资料中发现，以水为溶剂，顶空温度为100 ℃，柱温 60℃，结果高浓度的乙腈比低浓度的二氯甲烷的峰面积还小，原因是顶空温度太高，大量的水被蒸发（或浓度被稀释），随着水蒸汽的凝结，在水中溶解度大的乙腈的灵敏度下降，产生了与事实不符的实验结果。 顶空时间是要确保供试品溶液的气-液两相达到平衡，一般通过测定顶空时间与顶空气体浓度的浓度 —时间曲线来确定。顶空时间不宜过长，一般为30~45分钟，如果超过 60min ，可能引起顶空瓶的气密性变差, 导致定量的准确性降低。如果平衡时间选择 10分钟，就不能保证气- 液两相达到平衡。对照品溶液与供试品溶液必须使用相同的顶空条件。 2、方法学验证 2.1系统适用性试验 柱效：用被测物的色谱峰计算，填充柱法的理论板数应大于1000 ，毛细管色谱柱的理论板数应大于 5000。 分离度：色谱图中被测物色谱峰与其相邻色谱峰的分离度应大于1.5 。 重复性：以内标法测定时，对照品溶液连续进样5次，所得被测物与内标物峰面积之比的相对标准偏差 (RSD)应不大于5% ；以外标法测定时，所得被测物峰面积的相对标准偏差 (RSD)应不大于 10% 。 2.2专属性 对各种残留溶剂定位和进行混合溶剂的分离度试验，分离度应大于1. 5 。同时空白溶剂对被测溶剂无干扰。 2.3线性 至少制备6个浓度（如定限，10%，20%，40%，60%，80%，100%，120%残留溶剂限度水平），相关系数不小于0.99。 2.4检测限和定量限 检测限为信噪比3～5时相应浓度或注入仪器的量。定量测定时需验证定量限，其限度为信噪比10～15时相应浓度或注入仪器的量。定量限应不高于残留溶剂限度的50%。 2.5精密度 2.5.1重复性 连续进样6次，标准溶液峰面积RSD不得大于10%。 2.5.2中间精密度 不同时间，不同实验人员，不同仪器，测得的供试品溶液中残留溶剂的峰面积RSD不得大于10%。 2.6准确度 在规定的范围内，至少9个测定结果。设计三个不同的浓度（一般加入80%，100%，120%三个不同限度浓度的标准溶液）进行测定，计算回收率和相对标准偏差，回收率应在80%～120%，各浓度水平回收率的RSD应不大于2.0%。 2.7耐用性 通过改变柱流速，初始柱温，色谱柱型号等，考察色谱参数的微小变化对结果的影响。 来源：原料分析 侯晓辉 上一篇：十年一线合成工艺放大实操总结 下一篇：检测实验室对测量不确定度的9大要求

检测实验室对测量不确定度的9大要求 添加时间：2019-04-11 按照CNAS实验室认可准则与CNCA资质认定评审准则，大体上可将检测实验室对测量不确定度的要求归纳为9条。 1、检测实验室应制定与检测工作特点相适应的测量不确定度评估程序，并将其用于不同类型的检测工作。 2、检测实验室应有能力对每一项有数值要求的测量结果进行测量不确定度评估。当不确定度与检测结果的有效性或应用有关，或在用户有要求时，或当不确定度影响到对规范限度的符合性时，当测试方法中有规定时和CNAS或CNCA有要求时（如认可准则在特殊领域的应用说明中有规定），检测报告必须提供测量结果的不确定度。 3、检测实验室对于不同的检测项目和检测对象，可以采用不同的评估方法。 4、检测实验室在采用新的检测方法时，应按照新方法重新评估测量不确定度。 5、检测实验室对所采用的非标准方法、实验室自己设计和研制的方法、超出预定使用范围的标准方法以及经过扩展和修改的标准方法重新进行确认，其中应包括对测量不确定度的评估。 6、对于某些广泛公认的检测方法，如果该方法规定了测量不确定度主要来源的极限值和计算结果的表示形式，实验室只要按照该检测方法的要求操作，并出具测量结果报告，即被认为符合本要求。 7、由于某些检测方法的性质，决定了无法从计量学和统计学角度对测量不确定度进行有效而严格的评估，这时至少应通过分析方法，列出各主要的不确定度分量，并作出合理的评估。同时应确保测量结果的报告形式不会使客户造成对所给测量不确定度的误解。 8、如果检测结果不是用数值表示或者不是建立在数值基础上（如合格/不合格，阴性/阳性，或基于视觉和触觉等的定性检测），则不要求对不确定度进行评估，但鼓励实验室在可能的情况下了解结果的可变性。 9、检测实验室测量不确定度评估所需的严密程度取决于检测方法的要求、用户的要求以及用来确定是否符合某规范所依据的误差限的宽窄。 上一篇：残留溶剂方法建立及方法学的验证 下一篇：原始记录的这些问题，每个实验人员都要懂

原始记录的这些问题，每个实验人员都要懂 添加时间：2019-04-11 总结实验室原始记录 01 不良记录习惯 1．将实验数据记录于纸片    实验操作时，由于未携带实验记录本，有时将某些实验现象随手记录于身边的纸片或其他纸质材料的空白处，本想以后再将其转抄至实验记录本，但由于随手记录的内容一般欠详细，待需要正式记录时遗忘了其细节甚至关键内容，或小纸片根本就遗失了。  为避免上述现象发生，须养成随身携带实验记录本的习惯，或将实验操作流程打印并贴于操作台，打印时旁边留一定空间用于填写某些随想或改变的条件，待实验结束时再将其贴到实验记录本上。  2．实验记录不及时     有人习惯用脑子记忆当天（甚至几天）的实验过程，待空余时再将其记录于实验记录本，殊不知好记性远不如一只烂笔头，某些事情是瞬间记忆，转身即忘，或仅记住一部分，遗忘或记错的后果可能使某些重要实验现象被遗漏，有时恰巧是成功与失败的关键数据，导致与成功失之交臂。尤其对于某些实验操作过程中临时改动的条件，若未及时记录，即使此次实验成功，日后也难以重复，因为某些细微变化根本不可能回忆起来。 例：某学者喜用脑记忆，且习惯于临时改变实验条件，某次对一个长时间未能成功的实验进行改动，居然获得成功，为完善该实验的对照条件，须重复相同实验，但由于未及时记录改变的条件，事后花费半年时间才重复出相同结果，代价之大可想而知。 3．实验数据整理不及时    实验数据的及时整理极为重要，否则难以从中发现实验的某些规律，也难以对后续实验的实施和调整提供正确指导。实验者常期望在有限时间内尽可能多做一些实验，往往将实验数据简单整理，甚至不整理，即匆匆进入下一轮实验操作，结果可能导致某些实验错误持续性存在，或重复某些无意义、无价值的实验，或使应该深入的线索不能及时被发现，或导致长时间都在实验失败的痛苦中挣扎。所以在实验中，有时快即是慢，慢也可能即是快。养成实验后及时整理和分析实验数据的习惯，常会有意想不到的收获。  4．不记载实验的年份和时间     请将年份记载于实验记录上，因为转眼就是一年。有人总认为，一年的时间足够长，实验记录上除首页外，仅记录月日，尤其对可能需长期存放的试管也仅记录月、日，殊不知当回顾性分析某些实验结果时，非常依赖准确的时间。另外，很多人不习惯记录实验的具体时间（尤其身边无可提供准确时间的钟表），从而可能造成实验的实际发生时间与记录不符，有时直接影响对实验结果的分析。因此，应养成看表并记录时间的习惯。甚至记错时间，如******次免疫时间和加强免疫. 5．仅保留阳性结果    实验结果指经实验操作所获结果，其本质上无阳性和阴性之分，因为结果是客观的，阳性和阴性均为研究者在一定假设基础上所界定。因此，应保留实验所获的全部数据或现象。有人错误地认为“阳性”结果才有保留价值，并随意地将当时认为“阴性”的结果舍弃，待后续实验突然发现被舍弃的结果有意义时，已难以弥补。  总之，请勿纵容自己养成某些坏习惯，某些付出的代价是金钱和时间都难以挽回的。良好的科研素养对于研究者极为重要，应及时纠正不良习惯，重视实验记录的及时性、准确性和完整性。  6．仅记录符合主观想象的内容    实验记录指记录实验过程中所有实际发生的事件和现象。整个过程中的任何变化、所获得的任何正常或不正常的观察结果等均须如实记录。即便在出现很多错误的情况下，记录下实际发生的事情才能使日后解释实验成为可能。有人仅记录自认为成功的试验，而舍弃失败的试验。殊知失败乃成功之母，若不记录失败试验的全过程，难以分析失败的原因，也不可能缩短通往成功之路。 02 原始记录的原则 1、使用装订完整的实验记录本和受控的纸张、表格，不得将数据记录于私人笔记本、散页纸张或非受控的纸张、表格。 2、原始数据记录应及时而准确，所有的原始数据都应及时而清晰地记录下来。数据记录用笔通常为黑色或蓝黑色墨水笔，不允许使用铅笔等字迹可被抹擦掉的笔、或随着时间的推移字迹会褪色的墨水笔或圆珠笔等。不得移动粘贴于笔记本上的数据。 3、签名和日期  记录有检验数据或相关信息的所有页次都必须有当事人的签名和记录日期。如果同一页上的数据由多人记录，每位记录者均须署名并标明日期。所有的原始数据均须经第二者复核并签名认可。 4、数字记录  所有的记录数字应明晰并且附有相应的计量单位。在相应的检验规程中要阐明数字的处理方法，如科学记数法、关键数字的处理以及菌落计数的报告方法等。 5、多处引用的数据资料  在试验室，同一标准曲线往往会用于多个实验项目。务必清晰地注明数据的具体来源和确切存放位置，复印的数据资料要得到当事人的签名确认。 6、供试品制备 记录样品名称、批号以及在其容器外标明的其他相关信息均应作为原始数据记录下来。所有的样品重量都应作为原始数据记录下来。实验室要制订用于定性测试的样品的重量允许波动范围，一般情况下，用于定性的样品重量不超过其规定重量的±5%是可接受的。用于定量分析的样品必须用分析天平称量，并将完整的实际称量值记录下来。原始记录中应清晰地记下供试品的稀释度，包括溶剂体积和溶液的移取体积。 7、标准品制备记录  在原始记录中应注明标准品的名称、来源、批号、有效期、纯度和储存条件、前处理条件。如配制好的标准液被储备，应记下相应的储存条件和有效期。 8、特殊试验用菌种所有用于微生物试验的菌株都应清楚地标明菌种名称、代号(如CMCC  ATCC等)批号、有效期和传代次数。用子接种的菌悬液必须标明制备日期和有效期。具有可追溯性。定期将库存菌种与菌种保藏记录(菌种台账)进行核对。 9、试剂和缓冲液清楚地记录试剂、缓冲溶液的配制信息，包括试剂/缓冲溶液的配制批号、各组分的化学名称、供应商、批号、纯度、效期和用量，以及试剂和缓冲液******参数、包装方式、储藏条件和有效期等。 10、日期和时间  原始数据资料均按年历顺序记录时间和日期。日期务必与所做的工作相一致。要清楚地解释同一记录上的多个日期。任何可编程的数据采集系统应能准确反映实际日期和时间。实验室分析人员不能添加或更改一份已经签有名字和日期的记录，除非在添加便改处重新签名和签日期，并且对相应的添加或更正给予明确解释。 11、温度 实验室要规定统一的温度计录单位，如所有的培养温度均以摄氏度为单位。根据相应温度控制设备的管理要求按时记录温度。此外，还要定期对温度记录进行审核和趋势分析等。 12、删除和添加 处理删除和添加可能始终是***难遵从的要求的项目之一。在实验室，每个含有删除或添加的记录看上去总好像未经过正确处理或解释。原始数据中的错误须用单线划除，更正人要在更正记录处签上名字和日期并解释原因。任何影响到实验结果的变更记录都应当由另一人复核，复核人员******是主管或组长。  03 原始数据的处理和保存    不得销毁或丢弃原始数据，否则，必须重复试验。因此，实验室务必有相关规程以保证原始数据得到妥善保存面不会被丢弃。实验人员必须保存所有的原始数据，即使是被认为无效的数据也应保存。但须将无效数据用记号删去并简要说明原因。   如果原始数据是通过电脑、设备打印出来的，尤其是打印在热敏纸上时，要保存其复印件，并在复印件上注明原件的保存地点。不要在热敏打印纸上书写或枯贴胶带，因为这样会加速打印文字的退色淡化过程 上一篇：检测实验室对测量不确定度的9大要求 下一篇：分享丨几种菌种的保存及复苏方法！

原料药工艺放大中需要规避的技术陷阱 添加时间：2019-03-12 避免工艺放大过程中存在的各种问题，注重工艺放大过程中各种经验的积累，结合工艺放大过程中的规范流程和应避免的问题，同时意识到合作的重要性，会使原料药工艺放大能够更加顺利的开展。 1  工艺过程避免复杂 在工艺发展和放大中要尽可能简单，越简单，产生工艺错误的机会越少。在实际操作中，越复杂的工艺越不易为操作人员掌握，也很难通过操作规程详细的描述。 简化不仅是从安全考虑，同时可以减少生产周期，减少废物等。避免使用非常特殊的设备的反应。或者非常危险需要安全设施的反应，如硝化、氢化等。 工艺的简化来源于反应路线的简化，往往反应步数***少的路线就是******的路线。在工艺研发阶段需要考虑是否可以避免中间体的分离，合并反应，减少溶剂使用的种类和数量。 2 避免投入所有原料再加热 工艺中***危险的操作之一是将所有反应物一起加入再升温反应。同样不要***后投料后再加入催化剂。危险在于一旦反应混合物达到反应温度开始反应，就没有办法停止。有些反应是高度放热的，并且会自行升温至越来越高的温度。如果达到混合物的沸点就会沸腾甚至冲料。有些原料会在更高温度发生降解，并且降解会自加速，放热会比反应本身更剧烈。当反应需要紧急冷却时，切换和降温也没有小试方便迅速。 当然对于已经理解并确定是安全的反应，一次投入原料是可以接受的。但对于首次放大的工艺应是禁止的。 放热反应***常用的控制是采用一种试剂滴加，滴加的时间取决于反应的热量和反应釜的移热能力。在滴加时，要避免原料的累积，造成突然反应，需要在适合的温度滴加，保证滴加的原料能立即反应，比如格氏试剂的制备。 3  避免在没有搅拌的情况下加热 生产中反应釜内的传热主要依靠搅拌。除了保证安全，良好的搅拌能减少釜内的温度差，使温度读数更准确。一般釜壁的温度会比体系中心温度更高些，会造成局部过热，是产品分解或结焦，***终影响产量和质量。也不能停搅拌，直到反应结束并冷却到安全温度。 比如一次事故的发生是由于有机胺和硫酸的强放热反应。按照工艺，需要在剧烈搅拌下将胺缓慢加入热硫酸中，反应是双相体系。一天操作员工更换，在没有开搅拌的情况下，开始加入胺，胺沉淀在反应釜底部没有反应。稍后另一个员工发现搅拌没有开，就启动了搅拌，在这一刻所有物料瞬间反应导致了爆炸。 4  不要忽视潜在的降解反应 不要在已知反应物降解温度50℃内进行反应，以免反应失控。除了对放热反应的量热评估，可以自加速的降解反应也需要考察。这需要附加的实验，比如绝热反应量热（ARC），如果分析认为反应可能产生潜在的不稳定易降解产物，应进行相应的量热实验。 有些降解反应可能进行的很慢，通过常规的测试无法辨识。即使低于引发温度，反应放热依然会以很小的速度增加，等到发现温度明显上升时，分解反应已经发生。 国内一家原料药厂在进行重氮化反应时，在保温阶段，操作人员关闭蒸汽阀门，离岗吃饭，由于蒸汽阀门内漏，导致反应温度上升，重氮盐分解。由于无人值守，没有及时发现温度上升，等当班工人回岗发现温度异常上升时，反应已无法控制，***终发生爆炸，整个车间被毁。 5  避免向反应混合物中投加固体 不要将固体投入正在回流或热的反应混合物。这是在小试常见的操作，但在生产中难于实现。分次投加是为了控制反应，在小试中很容易实现。但在生产中投加固体物料必然要打开人孔，釜内已有的溶剂蒸汽会和空气形成爆炸性混合气体。如果物料反应很快，会导致料液喷出人孔（投钠氢时出现过类似事故）。 一种改进是考虑先加固体，再加溶剂。但改变投料顺序可能会影响反应的选择性。另外可以将固体溶解投加，甚至形成料浆再压入反应釜。 如果无法改变工艺，需要从工程方面考虑怎样进行密闭条件下的投加。这方面一直在进行尝试，进行改进，比如使用真空上料等，但目前还没有一个经济、良好的和普遍适用的解决方法，尤其对于一些具有腐蚀、剧毒品和流动性差的固体原料和中间体。 6  避免蒸发至干 使用旋转蒸发将料液浓缩至干的操作是小试很常用的。但在车间大多数反应釜有大约10–20%***小搅拌体积。当料液浓缩到***后，不可避免会在没有良好搅拌的情况下对物料进行加热。没有搅拌情况下进行加热的危害前已述及。这会引起安全和质量问题。当蒸干是为了更换溶剂时，采用蒸至一定体积时，加入后一种溶剂反复拖带，可以避免浓缩至干的操作，但这需要看两种溶剂的相对挥发度和是否共沸。更有效率的方式是采用“恒体积蒸馏”。 浓缩至干的工艺在我们的生产中很常见，如果小试工艺提供的工艺浓缩至干，生产也会按照实行。浓缩至干的操作可能比较简便，但是不可控的，没有衡量标准，也只有在后续产量和质量出现问题才会发现可能是前步蒸的不够干。出现过搅拌轴断裂，溶剂替换不彻底导致产率下降，浓缩后搅拌不好淬灭冲料。因此在研发时需要考虑是否有更好工艺实现。 7   避免对工艺时间估计不足 对于初次接触工艺放大的人，可能******的意外就是所有的操作都要这么长时间。重要的是在放大前进行所有涉及原料、中间体和产品的稳定性评估。避免反应后必须马上淬灭和分离的反应。 8  避免忽视溶剂使用问题 小试中可能会用到具有良好溶解性、易于蒸馏回收的溶剂。但其中一些是在生产中需要避免的。这包括所有的一类溶剂，闪点低于-18℃的溶剂。正己烷的闪点-23℃，并且导电性差，一般国外企业在生产中禁止使用，采用庚烷代替。但由于成本的问题，在一些工艺中还有使用。二氯甲烷的毒性低于其它氯代烷烃溶剂（氯仿，二氯乙烷等），但还是要尽量避免使用，在有些工艺中可以用甲基叔丁基醚、甲苯代替。 9  避免对于淬灭和提取的忽视 很多放大的问题来源于后处理过程。因此应该得到和反应一样的重视。避免分层的上层是废液。提取往往是溶剂体积******的步骤，为了提高单位体积的产能，应该尽量减少提取用的溶剂。随着溶剂数量的增加，分层和放料的时间也随之延长，乳化的现象可能加剧。在弱酸/碱环境下，萃取和分离时间的延长可能导致含易水解官能团的化合物水解。 在一个API中间体放大到80吨/年的规模时，其中一步提取需要2000L溶剂提取两次，共4000L溶剂，溶剂的转移就需要三四个小时。 乙酸乙酯作为一种常见的萃取溶剂，在酸/碱性环境下易水解产生乙酸，从而使体系酸性增强。可以采用更稳定的乙酸异丙酯或丁酯代替，溶剂饱和含水量较低更易回收。 10  安全 安全是***重要的。这里强调的是不要冒险把有限的原料一次性反应完。要预备可能的失败，尤其是对于新工艺。可以分成两批或更小的批次进行，避免由于所有的原料都用光而导致项目的暂停。同时小的批次单位传热面积更高，混合问题会减少，放大因数也相应减少。 上一篇：实验记录写不出来的赶紧收藏 下一篇：实验室管理制度大全(26项)

微生物实验室管理制度汇总！ 添加时间：2019-04-23 实验室管理制度 1．实验室应制定仪器配备管理、使用制度，药品管理、使用制度，玻璃器皿管理、使用制度，并根据安全制度和环境条件的要求，本室工作人员应严格掌握，认真执行。 2．进入实验室必须穿工作服，进入无菌室换无菌衣、帽、鞋，戴好口罩，非实验室人员不得进入实验室，严格执行安全操作规程。 3．实验室内物品摆放整齐，试剂定期检查并有明晰标签，仪器定期检查、保养、检修, 严禁在冰箱内存放和加工私人食品。 4．各种器材应建立请领消耗记录，贵重仪器有使用记录，破损遗失应填写报告；药品、器材、菌种不经批准不得擅自外借和转让，更不得私自拿出。 5．禁止在实验室内吸烟、进餐、会客、喧哗，实验室内不得带入私人物品，离开实验室前认真检查水电，对于有毒、有害、易燃、污染、腐蚀的物品和废弃物品应按有关要求执行。 6．负责人严格执行本制度，出现问题立即报告，造成病原扩散等责任事故者，应视情节直至追究法律责任。 仪器设备、管理使用制度 1．食品微生物实验室应具备下列仪器：培养箱、高压锅、普通冰箱、低温冰箱、厌氧培养设备、显微镜、离心机、超净台、振荡器、普通天平、千分之一天平、烤箱、冷冻干燥设备、匀质器、恒温水浴箱、菌落计数器、生化培养箱，电位 pH计、高速离心机。 2.实验室所使用的仪器、容器应符合标准要求，保证准确可靠，凡计量器具须经计量部门检定合格方能使用。 3．实验室仪器安放合理，贵重仪器有专人保管，建立仪器档案，并备有操作方法，保养、维修、说明书及使用登记本，做到经常维护、保养和检查，精密仪器不得随意移动，若有损坏需要修理时，不得私自拆动、应写出报告、通知管理人员，由经理同意填报修理申请、送仪器维修部门。 4．各种仪器（冰箱、温箱除外），使用完毕后要立即切断电源，旋钮复原归位，待仔细检查后，方可离去。 5．一切仪器设备未经设备管理人员同意，不得外借，使用后按登记本的内容进行登记。 6．仪器设备应保持清洁，一般应有仪器套罩。 7．使用仪器时，应严格按操作规程进行，对违反操作规程的因管理不善致使仪器械损坏，要追究当事者责任。 药品管理、使用制度 1．依据本室检测任务，制定各种药品试剂采购计划，写清品名、单位、数量、纯度、包装规格，出厂日期等，领回后建立账目，专人管理，每半年做出消耗表，并清点剩余药品。 2．药品试剂陈列整齐，放置有序、避光、防潮、通风干燥，瓶签完整，剧毒药品加锁存放、易燃、挥发、腐蚀品种单独贮存。 3．领用药品试剂，需填写请领单、由使用人和室负责人签字，任何人无权私自出借或馈送药品试剂，本单位科、室间或外单位互借时需经科室负责人签字。 4．称取药品试剂应按操作规范进行，用后盖好，必要时可封口或黑纸包裹，不使用过期或变质药品。 玻璃器皿管理 1．根据测试项目的要求，申报玻璃仪器的采购计划、详细注明规格、产地、数量、要求，硬质中性玻璃仪器应经计量验证合格。 2．大型器皿建立账目，每年清查一次，一般低值易耗器皿损坏后随时填写损耗登记清单。 3．玻璃器皿使用前应除去污垢，并用清洁液或2%稀盐酸溶液浸泡24 h后，用清水冲洗干净备用。 4．器皿使用后随时清洗，染菌后应严格高压******，不得乱弃乱扔。 安全制度 1．进入实验室工作衣、帽、鞋必须穿戴整齐。 2．在进行高压、干燥、******等工作时，工作人员不得擅自离现场，认真观察温度、时间，蒸馏易挥发、易燃液体时，不准直接加热，应置水浴锅上进行，试验过程中如产生毒气时应在避毒柜内操作。 3．严禁用口直接吸取药品和菌液，按无菌操作进行，如发生菌液、病原体溅出容器外时，应立即用有效******剂进行彻底******，安全处理后方可离开现场。 4．工作完毕，两手用清水肥皂洗净，必要时可用新洁尔灭、过氧乙酸泡手，然后用水冲洗，工作服应经常清洗，保持整洁，必要时高压******。 5．实验完毕，即时清理现场和实验用具，对染菌带毒物品，进行************处理。 6．每日下班，尤其节假日前后认真检查水、电和正在使用的仪器设备，关好门窗，方可离去。 环境条件要求 1．实验室内要经常保持清洁卫生，每天上下班应进行清扫整理，桌柜等表面应每天用******液擦拭，保持无尘，杜绝污染。 2．实验室应井然有序，不得存放实验室外及个人物品、仪器等，实验室用品要摆放合理，并有固定位置。 3．随时保持实验室卫生，不得乱扔纸屑等杂物，测试用过的废弃物要倒在固定的箱筒内，并及时处理。 4．实验室应具有优良的采光条件和照明设备。 5．实验室工作台面应保持水平和无渗漏，墙壁和地面应当光滑和容易清洗。 6．实验室布局要合理，一般实验室应有准备间和无菌室，无菌室应有良好的通风条件，如安装空调设备及过滤设备，无菌室内空气测试应基本达到无菌。 7．严禁利用实验室作会议室及其他文娱活动和学习场所。 来源：食品微生物检测 上一篇：中共中央国务院关于深化改革加强食品安全工作的意见 下一篇：十年一线合成工艺放大实操总结

十年一线合成工艺放大实操总结 添加时间：2019-04-23 我工作已经十年了，一直做研发工作，从实验室直接做到车间的那种。虽然感觉过得很快，但是十年还是一个很长的时间，至少当你真正沉下去做项目的时候，十年可以让你学到很多，我就把这十年在中试过程遇到的小麻烦总结一下，希望新人你吸取一下教训，更希望老手不要笑话我。 一个工艺在实验室小试成功了，这个只能代表他的工艺路线是通的，不代表他中试、工业化也能顺利，甚至中试工业化完全做不出来。小试和中试有很大的距离。 1、小试我们一般都是三口瓶、四口瓶，这个都是玻璃的，有什么现象清清楚楚，投料量也少，容易控制。但是生产就不行了，用的是搪玻璃、不锈钢反应釜，他是不透明的，看不到里面的东西。怎么办?就要在做小试、中试的时候多观察物料的变化情况，以便在工业化的时候做到什么步骤里面的情况能够心中有数，尽量的多增加计量点。 实例：有一个产品（不好意思，出于技术保密，所有物料产品不说名称，见笑），原药用到一个和水互溶的溶剂，合成结束后，脱去部分溶剂，加水析出。中试时怕 溶剂脱干以后出安全事故，溶剂接受罐又没有计量装置，开始3批收率都偏低。查找原因是溶剂脱出太少，造成加水量不足，有部分产品还在水里。解决方法，规定 脱出溶剂数量。 2、小试玻璃瓶温度计是可以升降的，即使够不着也可以看得到。但是反应釜就不同了，那个是定下来的。所以你要对你的设备心中有数。比如1000L的反应釜，******多少物料锚能搅得到，多少物料能打到温度计套管。物料粘度怎么样，量大以后用不用加大电机功率等。 实例：有一个产品，结晶以后回收母液时候没有注意到溶剂脱出以后物料的量，里面液相温度显示不出，一直开汽加热，爆炸，所幸没有伤到人。解决方法：用热水加热。浓度低的产品用小釜多次吸入脱溶。 3、小试的时候物料少，后处理时间很短。但中试工业化就不同了，这个处理时间要延长很多，必须考虑。 实例：有一个产品用三乙胺水溶液做溶剂，反应完过滤。抽滤的时候，把物料都放在抽滤槽中，时间长了以后物料温度升高，三乙胺分层，产品随着滤液抽走。解决方法：冷却以后少量多次抽滤，减少物料的存留时间。 4、小试的时候玻璃瓶没有保温层，投料量也很小，反应过程中的吸放热不明显，但反应釜就不一样了，这个就不同了，有保温，物料量也多。所以在小试的过程中 要注意观察反应到底是吸热还是放热，如果不确定的话，中试的时候******把能接的公用工程管道都接上，没有条件的时候也要在夹套预留一个管道，随时准备在罐头 上桶蒸汽或者冷却水。 实例：有一个产品，小试的时候滴加感觉没有放热，中试时，没有加装冷却管道，结果一批料滴了十多个小时。解决方法：加装冷却水管道。 5、做工业化设计的时候要考虑******，不能一意孤行，要多听取别人的意见。有个教授做了一个设计，他考虑到反应放热比较大，在反应釜内增加盘管。但是物料特 别粘稠，加装盘管一个，盘管外侧的物料搅不动，收率低。解决方法：拆除盘管，改用深冷盐水。钛盘管，不知要多少银子。 6、在选择工艺路线的时候要考虑到工业化的难易程度，还要考虑老板的喜好，以及周边的环境。周边的环境主要指的是环保压力。有的工艺环保压力大一点，在一些发达地区实行就比较困难。 实例：有一个产品，当时考虑的是成本，选了一条高压路线。准备做中试的时候上报老板，老板认为没有做高压的经验，浪费了大量的精力。所谓屁股决定脑袋，不同的位置肯定考虑问题的出发点肯定是不同的，保守一点的老板肯定不会选择风险大的工艺，他的身价性命全在上面啊，要理解。解决方法：换了一条路线。 7、中试的时候如果全部是技术人做，那就麻烦了。实验人员和车间操作人员所具备的技能是不同的，好的实验人员不一定是一个好的工人。如果是技术人员带领不太熟练的工人，技术人员要多费心巡查，是不是该开的阀门没开，该关的阀门没关，一定要现场确认。如果是技术人员带领负责任的熟练工人、操作骨干，恭喜你，你所做的只是把工艺规程做好，然后在操作室陪他们聊聊天，顺道解决一下他们的疑问，遇到麻烦的时候主动把责任承担起来，不要推到操作上。 实例：有一个产品，中试的时候没有在现场，别人带着几个才招聘来的工人做，物料打到沉降罐的时候没有检查罐底阀门。那钱，哗哗的，都进下水道了。 8、中试、工业化设计的时候要把设备高清楚，外径、高度、重量等等，还要考虑到阀门的安装是不是便于操作，放空口是不是对着操作面等。出了这些问题，安装以后你就等着被工艺骂吧。 实例：******次做钢平台，反应釜说明书没有看仔细，釜孔留小了，所有的反应釜吊装时全部都是把夹套罐头割掉才能吊上来，那可是压力容器啊。当时感觉都没脸见人了。 9、要善于总结经验教训。面对一个陌生的东西，大家都可能犯错，但是犯错就要记住，尽量不要在两次都掉在同一个坑里。 10、总之，小试是打通工艺路线。工艺路线通了，大的方向已经没有问题了，中试工业化考虑的就全部都是细节问题。要多想、多问。中试的时 候出现小问题是正常的，如果一切正常的话我还感觉不正常了。出了问题要多想，原因很多，但根据我的经验，真正的原因只有一个，但不要怀疑一切。 11、******不要站在反应釜边上改工艺规程，有什么想法在实验室做完以后再拿到车间。很容易出事故的。 12、要善于和人沟通。自古文人相轻。文人这个东西啊，认识俩字会写自己名字就很容易觉得自己了不起，看不起别人。但是不要忘了老祖宗告诉我们，尺有所 长、智者千虑等等名言，别人也会有比我们强的地方的。比如车间操作工人，他所具备的技能你不一定会，当然也不要求你会，但你不能拿你的长处和他比，就看不 起他吧？在工艺实施的全部过程要和相关人员多沟通，多听取别人的意见，哪怕是错的，也是一条思路。 上一篇：微生物实验室管理制度汇总！ 下一篇：残留溶剂方法建立及方法学的验证

手把手教你做测试方法确认（附指导书SOP） 添加时间：2019-06-06 实验室如何进行检测方法确认？ 方法确认具体来讲包括了标准方法的证实和非标方法的确认两个方面。 我们先来看看方法确认和方法证实的目的是什么： 非标准方法确认目的： 该非标准方法能否合理、合法使用； 标准方法证实目的： 实验室是否有能力按标准方法开展检测、校准活动。 接下来我们看看标准方法证实和非标方法的确认应该如何做： 标准方法证实： 从人、机、料、法、环、测几个方面去证实实验室有能力满足标准方法的要求，有能力开展检测、校准活动。 证实的内容要从七方面去做： (1) 对执行新标准所需的人力资源的评价，即检测、校准人员是否具备所需的技能及能力；必要时应进行人员培训，经考核后上岗； (2) 对现有设备适用性的评价，诸如是否具有所需的标准、参考物质，必要时应予补充。 (3) 对设施和环境条件的评价，必要时进行验证。 (4) 对物品制备，包括前处理、存放、辅助试剂等各环节是否满足标准要求的评价。 (5) 对作业指导书、原始记录、报告格式及其内容是否适应标准要求的评价。 (6) 对新旧标准进行比较，尤其是差异分析与比对的评价。 (7) 按标准要求进行完整模拟检测，出具完整结果报告。 标准方法证实应有相关的文件规定及其证实的记录，标准方法变更后应重新证实。 非标准方法确认： 一个非标方法的确认，在文件中要包括以下内容： a) 方法适当的标识； b) 方法所适用的范围； c) 检测或校准样品是什么类型，以及对样品的描述； d) 被测参数的范围； e) 方法对仪器、设备的要求，包括仪器设备关键技术性能的要求； f) 需要用到的的标准物质； g) 方法对环境条件的要求，对环境稳定周期的要求； h) 操作步骤，包括： —样品的标志、处置、运输、存储和准备； —检测、校准工作开始前需要进行的检查； —检查设备工作是否正常，需要时，使用前之前对设备进行校准和调整； —结果的记录方法； —安全注意事项； i) 结果接受（或拒绝）的准则、要求； j) 需记录的分析数据； k) 不确定度评定。 非标方法的技术确认，需要从五个方面确认： (1)使用参考标准或标准物质进行比较； (2)与其他方法所得的结果进行比较； (3)实验室间比对； (4)对影响结果的因素作系统性评审； (5)根据对方法的理论原理和实践经验的科学理解，对所得结果不确定度进行的评定。 技术确认要尽可能******，并需有确认记录。 化学分析测试方法确认指导书（SOP） 1、目的  对实验室选用的各种方法进行确认，以证实实验室能够正确运用这些方法，并能证实该方法适用于预期的用途，在误差的允许范围之内，可在本实验室内运行。 2、范围  适用于实验室引进的标准方法或对非标准方法、实验室设计（制定）的方法、超出其预定范围使用的标准方法、扩充和修改过的标准方法；也适用于对新方法/新技术研究而建立新方法。 3、职责 3.1 技术负责人指定专人负责方法的确认，并对方法确认的结果进行核查批准； 3.2 参加方法确认的工程师应详细记录试验现象及数据，总结实验结果，并编写成文件； 3.3 相关人员严格按此作业指导书作业书。 4、名词解释 4.1 检出限 方法检出限是指某一方法在给定的置信水平上可以检出被测物质的***小浓度（相对检出限）或***小质量（******检出限）。方法检出限的确定方法有不 同，根据不同的检测方法选择合适的确定方法。 4.2 线性 线性关系是指分析方法能够得到与被测物质的量或浓度具有直线关系的测定值的能力。 4.3 精密度 精密度是指从均匀样品中抽取的复数个待测样品进行重复分析测定时，所得到的一系列测定数据彼此之间的一致程度。测定值的误差以偏差、标准偏差、或相对标准偏差的形式表示。 4.4 准确度 准确度指分析方法所得测定值与真实值（标准值）相符合的程度，通常以测定重现精密度时所得总平均值与真值的差于真值的比值表示（真值一般使用理论值，如果理论值不存在或即使存在但很难求出的情况下，可采用经过确证或认可的数值来代替）。 4.5 分析结果的不确定度 测量不确定度：表征合理地赋予被测量之值的分散性，与测量结果相联系的参数。 在实际工作中，结果的不确定度可能有很多来源，例如定义不完整、取样、基体效应和干扰、环境条件、质量和容器的不确定度、参考值、测量方法和程序中的估计和假定、以及随机变化等。方法确认时，应努力尝试找出影响不确定度的所有分量，并作出合量的评估，并应确保报告结果的表达方式不会引起错觉。合理的评估应建立在对方法实施知识以及测量范围的基础上，并利用过去的经验。对各影响量产生的不确定度分量不应有遗漏，也不能有重复。在评定测量不确定度时，对给定条件的所有重要不确定分量，均应采用适当的分析方法加以考虑。 4.6方法的灵敏度 灵敏度可用仪器的响应值或其它指示量与对应的待测物质的浓度或量之比来描述。一个方法的灵敏度可因试验条件的变化而变化。在一定的实验条件下，灵敏度具有相对的稳定性。 5、作业内容 5.1  线性评价 5.1.1  准备至少5个不同水平的标准溶液，做标准曲线，对其回归方程及线性相关系数进行评价。 5.1.2  标准曲线的******点浓度不大于******点浓度的50倍。 5.1.3  曲线的******点******和报告的检出限相近。 5.1.4  GC等有机测试的相关系数应该≥0.99，ICP等无机测试的相关系数应该≥0.995 5.2   检出限确认…

【微生物】微生物检测实用宝典！这么详细的微生物检测注意事项，值得收藏！ 添加时间：2019-05-22 接种与分离方法 根据待检样品的性质、培养目的和所用培养基的种类，采用不同的接种方法。 1.平板划线分离培养法 对混有多种******的样品，采用划线分离和培养，使原来混杂在一起的******沿划线在琼脂平板表面分离，得到分散的单个菌落，以获得纯种。划线的形式有多种，可将一个平板分成四个不同面积的小区进行划线，******区（A区）面积***小，作为待分离菌的菌源区，第二和第三区（B、C区）是逐级稀释的过渡区，第四区（D区）则是关键区，使该区出现大量的单菌落以供挑选纯种用。为了得到较多的典型单菌落，平板上四区面积的分配应是D＞C＞B＞A。 2.琼脂斜面接种法 主要用于菌落的移种，以获得纯种进行鉴定和保存菌种等。用接种环（针）挑取单个菌落或培养物，从培养基斜面底部向上划一条直线，然后再从底部沿直线向上曲折连续划线，直至斜面近顶端处止。 3.穿刺接种法 此法多用于半固体培养基或三糖铁、明胶等具有高层的培养基接种，半固体培养基的穿刺接种可用于观察******的动力。接种时用接种针挑取菌落，由培养基中央垂直刺仄至距管底0.4cm处，再沿穿刺线退出接种针。三糖铁等有高层及斜面之分的培养基，穿刺搞层部分，退出接种针后直接划线接种斜面部分。 4.液体培养基接种法 用于各种液体培养基如肉汤、蛋白胨水、糖发酵管等的接种。用接种环挑取单个菌落，倾斜液体培养管，在液面与管壁交界处研磨接种物，使******均匀得散落在液体培养基中。此接种法应避免接种环与液体过多接触。 5.倾注平板法 本法主要用于饮水、饮料、牛乳和尿液等样品中的******计数。取纯培养物的稀释液或原样品lml至无菌培养皿内，再将已融化并冷却至45-50℃左右的琼脂培养基15-20ml倾注入该无菌培养皿内，混匀，待凝固后置37℃培养，长出菌落后进行菌落计数，以求出每毫升样品中所含菌数。 6.涂布接种法 涂布法接种是一种常用的接种方法，不仅可以用于计算活菌数，还可以利用其在平板表面生长形成菌苔的特点用于检测化学因素对微生物的抑杀效应。将一定量的菌液或稀释液加到琼脂培养基表面，然后用******的L型玻璃棒或棉拭子于不同的角度反复涂布，使被接种液均匀分布于琼脂表面，然后贴上药敏纸片，或直接培养，本法经培养后******形成菌苔。 高压******锅******效果的监测方法 高压锅的******效果关系到***终试验结果的成败，因此，实验室要定期对高压锅的******效果进行监测，目前监测的方法主要有以下3种： 1、化学指示卡 化学指示卡只能监测******锅的******温度，并不能准确监测******时间，通过颜色变化来达到监测效果。 优点是使用方便快捷，缺点是不能准确监测******时间。  如果高压锅使用的频率较高，建议每次都在需要******的的材料外侧使用化学指示卡作为标识。 2、留点温度计 留点温度计标化合格后方可用于验证试验。检测前，需将温度计的水银柱甩至40℃以下。每次监测后留点温度计的温差应在1℃之间，则说明******器内的温度分布是均匀的。 如果高压锅使用的频率较高，建议每个月用留点温度计对高压锅******效果进行监测。 3、生物指示剂 生物指示剂是一类特殊的活微生物制品，可用于确认******设备的性能，******程序的验证，生产过程******效果的监控等。  1）按结构分可分为片状生物指示剂和自含式生物指示剂。一般来说都是用的自含式的多，就是里面有菌片，外面是密封的安瓿。 2）按培养时间可分为通用型生物指示剂和快速型生物指示剂。通用型生物指示剂根据芽孢复苏后指示菌种新陈代谢引起培养液pH改变，通过酸碱指示剂变色来进行判读，时间一般在24或48小时以上；而快速型生物指示剂根据芽孢复苏后的酶促反应，通过荧光进行判读，时间一般为3-4小时，同时国外正在研发更加快速的生物指示剂，有望在1小时之内得出结果。 生物指示剂也是GB15981-1995《******与******效果的评价方法与标准》中推荐使用的压力蒸汽******效果的监测方法。  优点是能够准确监测******温度和时间，缺点是所需时间较长。 建议每个季度用生物指示剂进行高压锅******效果的监测。 定量检测方法（平板法）注意事项 食品微生物学检验可分为定量检验和定性检验两类，其中定量检验又以平板法和MPN法两种***为常见。下面以平板法为例，简单介绍下定量检测中一些常见注意事项，以供大家在日常工作中参考。 1、均质效果对试验结果的影响。均质过程是将样品与稀释液混匀的过程，如果均质效果不好就会使样品中的微生物不能充分混匀到稀释液中，那么试验结果就不能体现样品的真实情况。一般试验数值都小于真实值，目前国标推荐的均质方式是旋转刀均质器的均质杯法和拍击式均质器的均质袋法。大家可以根据自己样品的实际情况进行选择。 2、十倍梯度稀释对试验结果的影响。十倍梯度稀释对定量检测方法的影响是很大的，因为它可以将试验误差成倍的放大。比如10-1到10-2稀释时，如果只取了0.98mL，那么到10-5时，误差就被放大了1000倍。所以在这步操作时一定注意取液量要准确，并且每次稀释后，要将稀释液混合均匀，再进行下一步稀释。 3、平板接种的注意事项。无论是涂布还是倾注接种，都要让微生物分布均匀，且尽量靠近中间，远离边缘，因为菌落生长在边缘时，不容易读取，且易连成片，在涂布时，要在平板中间加入稀释液开始涂布，尽量不要将液体涂布到边缘。在倾注时，也要将稀释液加到平板中间，然后倾注培养基，并轻轻旋转平板，使之混合均匀。 大肠菌群MPN法的常见问题 ①试验所依据的标准 首先，查看要求MPN值的单位，是MPN／g还是MPN／100g。如果是MPN／g，按照 GB4789.3-2010进行试验；如果是MPN／100g，依据卫生部颁布的通知要求，可以按照GB4789.3―2003进行试验。 ②双料的接种和MPN表的检索方法 如果制备的稀释度为10-1、10-2、10-3。其中，10-1取10mL接种于3管双料初发酵培养基中，另取10-1 1mL接种于3管单料初发酵培养基中，10-2取1 mL接种于3管单料初发酵培养基中。完成MPN法的初发酵接种。 ***后判定结果时，要依据复发酵的结果来推出初发酵为阳性的管数，再结合初发酵接种的稀释度为1，0.1，0.01。检索MPN表进行判定，注意表内MPN值随稀释度的变化有相应的变化。 ③如何判定产气 在MPN法中，初发酵和复发酵阳性管的主要判定依据是产气，但做样品检测时，很多时候大肠菌群的产气量不多，在小导管中很难看到，这时不能直接判定为阴性。轻轻晃动试管，然后将试管倾斜一定角度，如果有大量小气泡从底部升上来，并有逐渐增多的趋势，可判定为阳性。 生化试验可疑菌纯化的目的 致病菌检测过程中，生化试验或者初步筛选以后确证性试验以前，一般要求将可疑菌菌落纯化于特定营养型平板上，比如单增李斯特检验使用TSA-YE进行可疑菌纯化，沙门氏菌和志贺氏菌检测使用营养琼脂进行纯化。可疑菌纯化的目的有如下几点： 一、根据纯化以后的平板上生长的菌落大小及形态，可以判断挑取的可疑菌是不是单独的纯菌落，有没有发生菌落叠加现象。 二、生化试验一般项目较多，选择性分离平板上的可疑菌一般都带有颜色，无法制作菌悬液。生长较小的可疑单菌落无法满足接菌量要求，而且不能保证每个项目接菌量相同。实验结果会有差异。而纯化以后的平板上的所有菌落均来源于同一个单菌落，有大量的菌供生化试验使用。 三、选择性分离平板一般都成分复杂，并且有一定抑制性，其中可能含有某些对个别生化产生影响的物质。而用于纯化的平板都是营养型的，不会对生化项目造成影响。 沙门氏菌检验中血清学试验常见问题 血清学鉴定是沙门氏菌检验中的重要鉴定方法，包括菌体抗原（0）鉴定、鞭毛抗原（H）鉴定和Vi抗原鉴定。由于血清学试验涉及的内容很多，所以我们在此给大家列出几个常见问题，以供大家在日常工作中参考。 1、沙门氏菌判定时以生化试验结果为主还是血清学试验结果为主？ 我们在判定时应该以生化试验结果为主，在生化试验的基础上进行血清学判定。有的试验人员会直接用多价血清进行试验，不进行生化试验，这是******不可取的。因为血清学的原理是抗原抗体结合，非沙门氏菌的微生物也有可能带有沙门的类似抗原的。所以我们做鉴定的时候，必须先进行生化试验，在生化试验的基础上进行血清学鉴定。 2、血清学试验要做到什么程度？ 如果我们只需要鉴定某个菌株是否属于沙门氏菌，那只需要做0多价和H多价血清就可以了。如果需要鉴定某个菌株具体是什么沙门氏菌，比如是否为鼠伤寒沙门氏菌或是否为肠炎沙门氏菌，那就需要进行血清学分型试验，从多价血清一直做到0抗原和H抗原的单因子，然后参照GB4789.4-2016沙门氏菌检验标准中附录B的表格查找对应的沙门菌名。 3、0多价血清不凝集，就一定是0抗原阴性么？ 我们在做0多价血清时，如果没有凝集并不能直接判定为阴性，因为我们还要考虑Vi抗原的影响。Vi抗原属于K抗原群，是会阻隔0抗原和相应抗体的结合，所以有Vi抗原存在时，0多价血清是不会凝集的。GB4789.4-2016沙门氏菌检验标准中提到已知具有Vi抗原的菌型有：伤寒沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌和都柏林沙门氏菌。因此，我们必须去除Vi抗原的影响。具体方法是将待检菌做成浓菌液，放入100℃沸水中煮沸15-60分钟，目的是破坏Vi抗原，然后再挑取菌液做0多价血清。如果还是不凝集，才能判定为阴性。 荧光实验结果观察 日常试验中，经常会遇到大肠杆菌需要观察荧光是情况。国标GB 4789.38-2012大肠埃希氏菌计数中第二法（VRBA-MUG计数），GB/T 5750.12-2006 水及水源水中的大肠埃希氏检验，都需要观察荧光，可见荧光结果观察的重要性。 MUG是4-甲基伞形酮-β-D-半乳糖苷的缩写，该物质为β-半乳糖苷酶作用的底物，β-半乳糖苷酶与MUG结合并剪切β-半乳糖苷键，释放荧光显色基团4-甲基伞形酮，在紫外光（入＝366nm）下观察，培养物发出蓝色荧光。 观察荧光的条件： 1）紫外光为366nm波长； 2）在黑暗的环境下观察，有助于更好的观察荧光； 3）紫外灯灯管******直接照射在待测平板或试管上，无玻璃等物品吸收紫外光。 4）使用空白管、阳性菌、阴性菌做对照。 推荐使用“简易便携式荧光检测灯”，不但具备以上三个要求，而且避免了紫外灯直接照射人的情况，对实验人员有所保护。 空白产荧光原因分析： 1）试管或平血洗涮不干净所致。试管或平血中残留4-甲基伞形酮，会导致空白有荧光。 2）观察荧光的紫外灯不合适。紫外灯波长虽为366nm，但外侧有玻璃灯罩、或者功率太大（瓦数太高、灯过亮）均会影响荧光效果。 3）试管或平血本身原因。有些试管或平血，本身由于质量原因，在紫外灯下自身就带有光亮。使用前，可以先拿几种试管或平血装入蒸馏水，先在紫外灯下观察一下，然后挑取亮度比较暗的容器使用。 建议： 建议做荧光试验时，采用阳性对照菌同时观察，可更简单明了。 上一篇：手把手教你做测试方法确认（附指导书SOP） 下一篇：实验记录写不出来的赶紧收藏